試管嬰兒技術(shù)的9大操作流程
(+V:haoivf88)試管嬰兒的操作步驟是什么樣的，試管嬰兒在操作程序上又有什么樣的要求及注意事項(xiàng)?本文從女性控制排卵、卵泡監(jiān)測(cè)、卵子培養(yǎng)、體外受精、胚胎移植及移植后注意事項(xiàng)等9個(gè)方面詳細(xì)解讀試管嬰兒手術(shù)的操作步驟，下面讓我們一起來了解試管嬰兒操作的全過程吧。
1、控制性超排卵
由于自然月經(jīng)周期的長(zhǎng)短因人而異，同一患者在不同周期也存在差異，所以不易安排取卵時(shí)間，而且自然周期中只有一個(gè)優(yōu)勢(shì)卵泡可以發(fā)育，受精后只能形成一個(gè)胚胎，而移植一個(gè)胚胎的妊娠率是很低的。(+V:haoivf88)所以需要采用控制性超排卵來增強(qiáng)與改善卵巢功能，以達(dá)到不受自然周期的限制、獲得多個(gè)健康卵子的目的，提供多個(gè)胚胎移植，并盡可能使黃體發(fā)育與子宮內(nèi)膜功能同步。
控制性超排卵：一般是先用促激素使體內(nèi)FSH和LH降調(diào)，再施與激素排卵藥物，刺激卵巢中的卵泡成長(zhǎng)，依據(jù)患者對(duì)藥物的反應(yīng)性調(diào)整藥物使用劑量，患者的年齡及藥物的使用劑量不同，所獲得的卵子數(shù)亦不同。
目前促超排卵主要有4種方案：克羅米芬—人絕經(jīng)后促性腺激素(HMG)—絨毛膜促性腺激素(HCG);
HMG—HCG;
促卵泡激素(FSH)—HCG;
促性腺激素釋放激素(GnRH)—HMG—HCG;
(+V:haoivf88)常規(guī)使用的是克羅米芬—HMG—HCG方案。
2、監(jiān)測(cè)卵泡
為評(píng)價(jià)卵巢刺激效果與決定取卵時(shí)間，須利用陰道B超來監(jiān)測(cè)卵泡大小及卵泡成熟額進(jìn)程，并配合抽血檢查E2值 (雌激素)，調(diào)整用藥量，當(dāng)2~3個(gè)以上的卵泡直徑大于1.8cm，且1.4cm以上的卵泡數(shù)與E2值相當(dāng)，便可注射人絨毛促性腺激素(hCG)，促使卵泡成熟,在注射hCG后34~36小時(shí)取卵。
自然月經(jīng)周期中進(jìn)行排卵前監(jiān)測(cè)：世界上首例試管嬰兒成功就是用自然周期監(jiān)測(cè)排卵期排卵的，通過基礎(chǔ)體溫測(cè)定、內(nèi)分泌測(cè)定(血雌二醇值、尿中黃體生成素值)和B超的監(jiān)測(cè)，配合臨床觀察(宮頸粘液變化等)(+V:haoivf88)確定取卵時(shí)日。
3、取卵及卵子培養(yǎng)
女性采卵時(shí)間確定后，需進(jìn)行采卵手術(shù)，一般常用的采卵途徑有：
(1)剖腹直視下穿刺卵泡取卵;
(2)經(jīng)腹腔鏡取卵;
(3)B超引導(dǎo)下經(jīng)腹壁、尿道膀胱或陰道穿刺取卵，目前多采用經(jīng)腹腔鏡或B超指引下經(jīng)陰道取卵，后者尤為方便。
B超指引下經(jīng)陰道取卵法：在局部麻醉?xiàng)l件下，經(jīng)陰道B超引導(dǎo)，將取卵針穿過女性陰道穹窿，直達(dá)卵巢吸取卵子，并立即在顯微鏡下將卵子移到含胚胎培養(yǎng)液(含卵泡液)的培養(yǎng)皿中，置37 °C的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間取決于所取卵泡的成熟度，成熟者一般培養(yǎng)2～6小時(shí)。
4、取精
(+V:haoivf88)精子取出的時(shí)間與取卵的日子應(yīng)為同一天，取精前男性須洗凈雙手，用手淫法留取精液，取精所給的小杯是無菌的，取精一定時(shí)不要觸摸杯緣及杯內(nèi)。取出的精液將采用上游法或Percoll密度梯度離心法處理。
5、體外受精及胚胎體外培養(yǎng)
取卵后4~5小時(shí)左右時(shí)間內(nèi)，將用洗滌法處理的獲取體外能量的精子與卵子放在同一個(gè)培養(yǎng)皿中，共同培養(yǎng)15～24小時(shí)后，可在解剖顯微鏡下檢查，如看到有兩個(gè)原核存在于卵母細(xì)胞原漿中表示已授精，再繼續(xù)培養(yǎng)36～42小時(shí)，當(dāng)鏡下觀察到受精卵已分裂至4～8個(gè)細(xì)胞時(shí)，(+V:haoivf88)可考慮作胚胎移植。若精子質(zhì)量太差，則無法自然受精，將必須以顯微注射法強(qiáng)迫受精 (參考卵細(xì)胞漿內(nèi)單精子顯微授精)。
6、胚胎移植
受精卵在體外培養(yǎng)48~72小時(shí)可發(fā)育到8~16細(xì)胞期胚胎，此時(shí)依據(jù)患者的年齡、曾經(jīng)懷孕與否及胚胎的質(zhì)量，決定移植胚胎的數(shù)目，多余的胚胎可冷凍保存。胚胎移植一般不需要進(jìn)行麻醉。
目前胚胎移植多在受精后2~3天進(jìn)行，一般推遲胚胎移植的時(shí)間，則對(duì)體外培養(yǎng)的條件要求就越高，但是推遲移植時(shí)間更符合妊娠生理，同時(shí)也可通過自然篩選淘汰劣質(zhì)胚胎，可提高妊娠率，(+V:haoivf88)降低多胎率。
胚胎移植流程：手術(shù)時(shí)須將陰道及宮頸先用生理鹽水清潔再用培養(yǎng)液擦洗，將金屬或塑料導(dǎo)管置入頸管內(nèi)，醫(yī)生在顯微鏡下用1.3mm的聚四氟乙烯管從培養(yǎng)液內(nèi)吸出胚胎細(xì)胞加吸0.03～0.05ml 培養(yǎng)液或0.03～0.05ml受試者血清，然后將此管插入宮頸管導(dǎo)管內(nèi)放至距宮底0.5cm處，送胚胎入宮腔。
7、胚胎移植后補(bǔ)充黃體酮
胚胎移植后需臥床24小時(shí)，限制活動(dòng)3～4天，同時(shí)接受黃體酮治療，目前我們多采用注射法給予黃體酮支持黃體。
8、胚胎移植后第14天驗(yàn)晨尿確定是否妊娠
胚胎移植后14天需進(jìn)行β-GCG測(cè)定，可由驗(yàn)?zāi)蚧虺檠_定是否妊娠，如果確定妊娠，則改用hCG繼續(xù)補(bǔ)充到懷孕10周，如無妊娠情況，停用黃體酮。移植成功的妊娠屬高危妊娠予以監(jiān)護(hù)。
9、妊娠后14天，B超檢查胎兒數(shù)及胚胎著床部位。
