試管嬰兒技術的9大操作流程
(+V:haoivf)試管嬰兒的操作步驟是什么樣的,試管嬰兒在操作程序上又有什么樣的要求及注意事項?本文從女性控制排卵、卵泡監測、卵子培養、體外受精、胚胎移植及移植后注意事項等9個方面詳細解讀試管嬰兒手術的操作步驟,下面讓我們一起來了解試管嬰兒操作的全過程吧。
1、控制性超排卵
由于自然月經周期的長短因人而異,同一患者在不同周期也存在差異,所以不易安排取卵時間,而且自然周期中只有一個優勢卵泡可以發育,受精后只能形成一個胚胎,而移植一個胚胎的妊娠率是很低的。(+V:haoivf)所以需要采用控制性超排卵來增強與改善卵巢功能,以達到不受自然周期的限制、獲得多個健康卵子的目的,提供多個胚胎移植,并盡可能使黃體發育與子宮內膜功能同步。
控制性超排卵:一般是先用促激素使體內FSH和LH降調,再施與激素排卵藥物,刺激卵巢中的卵泡成長,依據患者對藥物的反應性調整藥物使用劑量,患者的年齡及藥物的使用劑量不同,所獲得的卵子數亦不同。
目前促超排卵主要有4種方案:克羅米芬—人絕經后促性腺激素(HMG)—絨毛膜促性腺激素(HCG);
HMG—HCG;
促卵泡激素(FSH)—HCG;
促性腺激素釋放激素(GnRH)—HMG—HCG;
(+V:haoivf)常規使用的是克羅米芬—HMG—HCG方案。
2、監測卵泡
為評價卵巢刺激效果與決定取卵時間,須利用陰道B超來監測卵泡大小及卵泡成熟額進程,并配合抽血檢查E2值 (雌激素),調整用藥量,當2~3個以上的卵泡直徑大于1.8cm,且1.4cm以上的卵泡數與E2值相當,便可注射人絨毛促性腺激素(hCG),促使卵泡成熟,在注射hCG后34~36小時取卵。
自然月經周期中進行排卵前監測:世界上首例試管嬰兒成功就是用自然周期監測排卵期排卵的,通過基礎體溫測定、內分泌測定(血雌二醇值、尿中黃體生成素值)和B超的監測,配合臨床觀察(宮頸粘液變化等)(+V:haoivf)確定取卵時日。
3、取卵及卵子培養
女性采卵時間確定后,需進行采卵手術,一般常用的采卵途徑有:
(1)剖腹直視下穿刺卵泡取卵;
(2)經腹腔鏡取卵;
(3)B超引導下經腹壁、尿道膀胱或陰道穿刺取卵,目前多采用經腹腔鏡或B超指引下經陰道取卵,后者尤為方便。
B超指引下經陰道取卵法:在局部麻醉條件下,經陰道B超引導,將取卵針穿過女性陰道穹窿,直達卵巢吸取卵子,并立即在顯微鏡下將卵子移到含胚胎培養液(含卵泡液)的培養皿中,置37 °C的培養箱中培養,培養時間取決于所取卵泡的成熟度,成熟者一般培養2~6小時。
4、取精
(+V:haoivf)精子取出的時間與取卵的日子應為同一天,取精前男性須洗凈雙手,用手淫法留取精液,取精所給的小杯是無菌的,取精一定時不要觸摸杯緣及杯內。取出的精液將采用上游法或Percoll密度梯度離心法處理。
5、體外受精及胚胎體外培養
取卵后4~5小時左右時間內,將用洗滌法處理的獲取體外能量的精子與卵子放在同一個培養皿中,共同培養15~24小時后,可在解剖顯微鏡下檢查,如看到有兩個原核存在于卵母細胞原漿中表示已授精,再繼續培養36~42小時,當鏡下觀察到受精卵已分裂至4~8個細胞時,(+V:haoivf)可考慮作胚胎移植。若精子質量太差,則無法自然受精,將必須以顯微注射法強迫受精 (參考卵細胞漿內單精子顯微授精)。
6、胚胎移植
受精卵在體外培養48~72小時可發育到8~16細胞期胚胎,此時依據患者的年齡、曾經懷孕與否及胚胎的質量,決定移植胚胎的數目,多余的胚胎可冷凍保存。胚胎移植一般不需要進行麻醉。
目前胚胎移植多在受精后2~3天進行,一般推遲胚胎移植的時間,則對體外培養的條件要求就越高,但是推遲移植時間更符合妊娠生理,同時也可通過自然篩選淘汰劣質胚胎,可提高妊娠率,(+V:haoivf)降低多胎率。
胚胎移植流程:手術時須將陰道及宮頸先用生理鹽水清潔再用培養液擦洗,將金屬或塑料導管置入頸管內,醫生在顯微鏡下用1.3mm的聚四氟乙烯管從培養液內吸出胚胎細胞加吸0.03~0.05ml 培養液或0.03~0.05ml受試者血清,然后將此管插入宮頸管導管內放至距宮底0.5cm處,送胚胎入宮腔。
7、胚胎移植后補充黃體酮
胚胎移植后需臥床24小時,限制活動3~4天,同時接受黃體酮治療,目前我們多采用注射法給予黃體酮支持黃體。
8、胚胎移植后第14天驗晨尿確定是否妊娠
胚胎移植后14天需進行β-GCG測定,可由驗尿或抽血確定是否妊娠,如果確定妊娠,則改用hCG繼續補充到懷孕10周,如無妊娠情況,停用黃體酮。移植成功的妊娠屬高危妊娠予以監護。
9、妊娠后14天,B超檢查胎兒數及胚胎著床部位。